作為最常見的消化係統惡性腫瘤之一，肝細胞癌(HCC)已成為全球癌症相關死亡的第四大原因，是嚴重威脅人類健康的重大疾病[1]。

        肝癌的發病過程涉及眾多異常表達的基因及相應信號通路，目前研究已表明基因表達的RNA轉錄後調控異常是導致肝癌的重要機製[2]。

        可變剪接(AS)是一種常見的轉錄後調控方式，通過對同一mRNA前體pre-mRNA的不同剪切及拚接，可以產生不同的mRNA剪接異構體，進而影響下遊蛋白產物的結構或功能，大大增加蛋白質功能的多樣性[3]。

        異常的可變剪接是腫瘤異質性產生的重要原因，同時在維持腫瘤增殖、遷移、侵襲以及治療耐藥中發揮重要作用[4, 5]。可變剪接過程主要由剪接因子調控，其中富含絲氨酸/精氨酸蛋白(SR)家族是主要的可變剪接激活蛋白，其異常表達可能在腫瘤發生發展中發揮不同作用[6]。

        實際上，SR蛋白家族的不同成員，如SRSF1、SRSF2、SRSF3、SRSF5、SRSF9等已經被證實在肝癌進展中扮演著不同的角色[7-9]。然而，作為該蛋白家族成員之一的SRSF10在腫瘤發生中的潛在功能仍然不為我們所知。

        近日，中南大學湘雅三醫院曹科團隊在著名期刊Journal of Experimental and Clinical Cancer Research發表了一項研究成果[10]。

        他們發現SRSF10在肝癌中表達水平升高，並與不良預後相關。從機製上講，SRSF10可通過調節細胞周期調節因子CDC25A的可變剪接，刺激肝癌細胞的增殖、侵襲，明確了SRSF10對於肝癌惡性表型的促進作用。

        論文首頁截圖

        研究人員首先基於公共數據庫以及臨床樣本，分析了SRSF10在HCC及癌旁正常組織中的表達差異。

        他們發現SRSF10在HCC中高表達，並與患者不良預後相關。他們還證實SRSF10可以促進肝癌細胞Hep3B和HepG2的增殖、侵襲等惡性生物學行為，並且細胞周期調節因子CDC25A可能是SRSF10調節的關鍵下遊因子。

        SRSF10與患者不良預後相關

        至於SRSF10促進肝癌的具體作用機製。曹科團隊發現，SRSF10可通過其RNA結合結構域與CDC25A pre-mRNA結合，發揮剪接作用，上調肝癌細胞中外顯子6缺失的CDC25A mRNA亞型(CDC25A △E6)表達。

        SRSF10調節CDC25A △E6亞型的表達

        之前的研究表明，CDC25A是CDC25家族中的重要成員，具有磷酸酶活性，可以激活細胞周期依賴性蛋白激酶(CDK)，在細胞周期轉換及有絲分裂過程中起重要作用，是癌症治療的潛在靶標[11]。

        那CDC25A △E6亞型與未經剪切的longer CDC25A(CDC25A L)在生物學功能上有何差異呢?曹科團隊在敲低內源CDC25A的肝癌細胞中分別回補CDC25A(△E6)及CDC25A(L)，結果顯示與CDC25A(L)相比，CDC25A(△E6)對肝癌細胞增殖、侵襲等惡性生物學行為的促進作用更顯著。這表明CDC25A(△E6)具有更強的腫瘤促進作用。

        CDC25A(△E6)具有更強的腫瘤促進作用

        與CDC25A(L)蛋白主要集中於細胞質不同，CDC25A(△E6)蛋白則主要在細胞核中表達，這是因為外顯子6編碼的蛋白區域(144-183aa)包含磷酸化修飾位點(S178)，該位點表達的缺失導致CDC25A(△E6)磷酸化水平的下調並增加了其細胞核定位，從而發揮更強的細胞周期調節作用，促進腫瘤惡性進展。

        此外，外顯子6的缺失還會導致CDC25A(L)的兩個泛素化修飾位點K150和K169的缺失，從而導致CDC25A(△E6)的泛素化修飾水平下調，蛋白質穩定性升高，表達水平上調。

        CDC25A外顯子6表達的缺失影響其細胞定位

        由此，研究人員證明，CDC25A外顯子6的可變剪接，導致了泛素化和磷酸化位點的缺失，提高了CDC20A(△E6)的穩定性並促進了其在細胞核的積累，從而發揮了更強的促癌作用。

        最後，研究人員在SRSF10過表達的細胞中分別敲低CDC25A(L)和CDC25A(△E6)。結果顯示，與敲低CDC25A(L)相比，敲低CDC25A(△E6)對腫瘤的惡性表型具有更為顯著的抑製作用。

        同時，HepG2細胞的異種移植模型也顯示：與CDC25A(L)相比，CDC25A(△E6)具有更強的促進腫瘤生長的作用。這進一步證明CDC25A的外顯子6的剪切是SRSF10介導的HCC的惡性表型的關鍵下遊機製。

        與CDC25A(L)相比，CDC25A(△E6)具有更強的促進腫瘤生長的作用

        總的來說，本研究不僅證實了SRSF10對HCC惡性進展的促進作用，更重要的是發現了CDC25A的可變剪接亞型CDC25A(△E6)，並證明其具有更強的促腫瘤作用。為CDC25A這一經典的促癌因子在腫瘤中的表達調控機製提供了新的見解，有助於推動該靶點相關抑製藥物的開發及應用。