近期,重慶醫科大學附屬第二醫院消化內科研究人員發表論文,旨在觀察水通道蛋白9(aquaporin9,AQP9)對人肝癌SMMC-7721細胞裸鼠皮下移植瘤生長的影響,並初步探討其可能的機製。研究指出,AQP9過表達抑製人肝癌SMMC-7721細胞在裸鼠皮下生長,並可能通過促進凋亡及抑製增殖兩種途徑參與調控,為深入研究分子機製奠定基礎,且有望成為腫瘤治療的新靶點。該文發表在2015年第07期《
近期,重慶醫科大學附屬第二醫院消化內科研究人員發表論文,旨在觀察水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)對人肝癌SMMC-7721細胞裸鼠皮下移植瘤生長的影響,並初步探討其可能的機製。研究指出,AQP9過表達抑製人肝癌SMMC-7721細胞在裸鼠皮下生長,並可能通過促進凋亡及抑製增殖兩種途徑參與調控,為深入研究分子機製奠定基礎,且有望成為腫瘤治療的新靶點。該文發表在2015年第07期《腫瘤》雜誌上。
將重組慢病毒LV-AQP9(以空載體LV-GFP作為陰性對照)導入SMMC-7721細胞中,構建SMMC-7721/LV-AQP9重組細胞。激光共聚焦顯微鏡下觀察重組慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721細胞中的感染效率,實時熒光定量PCR和蛋白質印跡法檢測AQP9 m RNA和蛋白在SMMC-7721細胞中表達的改變。采用FCM法和DAPI染色檢測細胞的凋亡情況。CCK-8法檢測SMMC-7721細胞增殖能力的變化。將重組肝癌SMMC-7721/LV-AQP9細胞和SMMC-7721/LV-GFP細胞分別接種於裸鼠皮下,觀察2組小鼠中移植瘤生長的情況,並采用HE染色觀察移植瘤及肺組織病理學的情況,免疫組織化學法檢測移植瘤中增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表達水平。
結果顯示, 激光共聚焦顯微鏡下觀察發現,重組慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721細胞中的感染效率為90%左右,且AQP9 m RNA以及蛋白在SMMC-7721細胞中的表達水平顯著增加(P值均<0.01)。與空白對照組和陰性對照組(GFP組)相比,AQP9過表達組(AQP9組)細胞的總凋亡率顯著增加(P<0.01);而AQP9組細胞在48~96 h各時間點的細胞增殖能力均受到抑製(P值均<0.05)。重複測量方差分析比較2組移植瘤體積的結果提示,AQP9組移植瘤體積顯著小於GFP組(F分組=79.161,P分組=0.000),AQP9組皮下移植瘤生長速度明顯小於GFP組(F分組×時間=18.481,P分組×時間=0.002)。AQP9組移植瘤中PCNA蛋白表達水平較GFP組下調。
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