近期,南京醫科大學胰腺研究所研究人員發表論文,旨在探討人胰腺星狀細胞的兩種新分離方法。研究指出,新的原代培養方法能夠滿足靜止態和激活態兩種狀態胰腺星狀細胞的分離培養,同時能夠增加細胞得率、縮短分離培養時間,所獲得細胞的活性和純度符合進一步實驗的要求,為胰腺星狀細胞的相關研究提供了便利。該文發表在2015年第04期《南京醫科大學學報(自然科學版)》雜誌上。 通過酶消化-密度梯度離心法進行靜
近期,南京醫科大學胰腺研究所研究人員發表論文,旨在探討人胰腺星狀細胞的兩種新分離方法。研究指出,新的原代培養方法能夠滿足靜止態和激活態兩種狀態胰腺星狀細胞的分離培養,同時能夠增加細胞得率、縮短分離培養時間,所獲得細胞的活性和純度符合進一步實驗的要求,為胰腺星狀細胞的相關研究提供了便利。該文發表在2015年第04期《南京醫科大學學報(自然科學版)》雜誌上。
通過酶消化-密度梯度離心法進行靜止態的人正常胰腺星狀細胞的分離,分離獲得的細胞在含10%FBS的DMEM/F12繼續培養。通過組織塊外植法獲得激活態的人腫瘤相關胰腺星狀細胞(Ca PSCs),分離獲得的細胞在含20%FBS的DMEM/F12繼續培養。
通過方法改良,1 g人正常胰腺組織能夠獲得(0.5~5.0)×106個星狀細胞,細胞活率約為90%。使用新的組織塊外植法後,組織塊不易掉落,細胞爬出時間顯著縮短,約5~10 d即可獲得Ca PSCs。所有細胞貼壁良好,細胞倍增時間約為24 h。正常胰腺星狀細胞(normal pancreatic stellate cells,NPSCs)培養早期形態符合典型靜止態星狀細胞特征,細胞為多邊形或圓形,內含豐富脂滴,在熒光顯微鏡下可觀察到320nm激發波長下的藍綠色自發熒光。NPSCs培養晚期和Ca PSCs呈多觸角狀,胞內無脂滴,細胞增殖速度明顯快於靜止態細胞。激活態的細胞均表達α-SMA、Desmin、vimentin、GFAP等胰腺星狀細胞特征性標記。
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