目的：組蛋白乙酰化為常見的表觀遺傳方式。本課題組前期研究發現，心髒發育相關轉錄因子受到組蛋白乙酰化的調控，而組蛋白乙酰化狀態則通過組蛋白乙酰化酶(HATs)和組蛋白去乙酰化酶(HDACs)調節。然而，組蛋白乙酰化並沒有特異性，在心髒發育過程中是否存在輔助因子，協助HATs識別心髒發育相關轉錄因子以介導其啟動子區組蛋白的乙酰化？Islet-1為心髒發育早期的重要轉錄因子，其結構符合該輔助因子的需求。本研究探討Islet-1是否作為此種輔助因子介導組蛋白乙酰化參與心髒發育相關轉錄因子的調控。 方法：
目的：組蛋白乙酰化為常見的表觀遺傳方式。本課題組前期研究發現，心髒發育相關轉錄因子受到組蛋白乙酰化的調控，而組蛋白乙酰化狀態則通過組蛋白乙酰化酶(HATs)和組蛋白去乙酰化酶(HDACs)調節。然而，組蛋白乙酰化並沒有特異性，在心髒發育過程中是否存在輔助因子，協助HATs識別心髒發育相關轉錄因子以介導其啟動子區組蛋白的乙酰化？Islet-1為心髒發育早期的重要轉錄因子，其結構符合該輔助因子的需求。本研究探討Islet-1是否作為此種輔助因子介導組蛋白乙酰化參與心髒發育相關轉錄因子的調控。
方法：培養心肌祖細胞，以轉染Islet-1 RNAi慢病毒作為Islet-1抑製組，轉染空載體慢病毒作為空載體對照組，未轉染慢病毒作為空白對照組。Q-PCR檢測心髒發育相關轉錄因子mRNA的表達水平。通過Western blot檢測組蛋白H3乙酰化水平。運用 ChIP-Q-PCR檢測轉錄因子啟動子區乙酰化水平及與p300結合情況。
結果：Q-PCR結果顯示 Islet-1 抑製組中心髒發育相關轉錄因子Islet-1、Mef2c、Tbx5 的mRNA相對表達量與空白對照組和空載體對照組相比有明顯降低（P < 0.05）。而 Gata4 的mRNA相對表達量各組間差異不具有統計學意義（P >0.05）。Western blot結果顯示空白對照組、空載體對照組及 Islet-1 抑製組之間組蛋白H3乙酰化水平沒有明顯變化，差異不具有統計學意義（P >0.05）。ChIP-Q-PCR 結果提示Islet-1抑製組中Mef2c啟動子組蛋白乙酰化水平及與p300結合情況較空白對照組和空載體對照組有降低（P <0.05），而Gata4、Tbx5 的啟動子組蛋白乙酰化水平及與p300結合情況各組間則沒有統計學差異（P <0.05）。
結論：以上數據表明，抑製Islet-1可能降低 p300 與 Mef2c 啟動子區的結合，從而下調 Mef2c 啟動子區乙酰化水平，進而影響 Mef2c 的表達。Islet-1作為輔助因子介導組蛋白乙酰化參Mef2c的調控。但 Gata4、Tbx5 可能並非通過該途徑而受到組蛋白乙酰化的調控，其調控方式仍需進一步研究。
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